معرفی و مزایای دستگاه HPLC

تکنیک HPLC (کروماتوگرافی مایع با کارایی بالا ) امروزه به عنوان تکنیکی بسیار دقیق و قدرتمند جهت تجزیه کمی مواد دارویی، شیمیایی و تجزیه پروتئینها و اسیدهای نوکلئیک کاربرد دارد. در این روش جداسازی، فاز ساکن و فاز متحرک اغلب هردو مایع می باشند، اگرچه گاهی ممکن است فاز ساکن جامد باشد، فاز متحرک همیشه مایع است. متداول ترین ماده جامد به کار رفته در HPLC سیلیکاژل و آلومینا می باشد و فاز متحرک به گونه ای انتخاب می گردد که تداخلی در آشکار ساز دستگاه ایجاد نکند. موادی که به عنوان فاز متحرک در دستگاه HPLC کاربرد دارند شامل اتانل و پروپانول با هپتان و یا کلروفرم با هپتان می باشند.  آنچه که باعث جداسازی مواد مختلف در طول ستون کروماتوگرافی می گردد، دو فاکتور مهاجرت مواد در نمونه اصلی با سرعت های متفاوت و پراکندگی مولکولهای هر جزء در طول ستون می باشد.

مزایای دستگاه HPLC نسبت به بقیه روش ها: استفاده از روش HPLC بسیار آسان است. مدت زمان لازم برای آنالیز بسیار اندک است. در سیستم HPLC دو فاز ثابت و متحرک با مکانیسم رقابتی عمل می کنند که این امر موجب انجام آنالیزهای دقیق می شود. در این روش برای هر گروه از ترکیبات خاص، دتکتورهای انتخابی ویژه وجود دارد که کمیت و کیفیت آنالیز را به بهترین صورت ممکن افزایش می دهند. ترکیبات آلی ناپایدار و غیر فرار به سادگی تحت آنالیز قرارمی گیرند. جداسازی، خالص سازی و شناسایی پروتئین ها و ترکیبات آلی بویژه ترکیبات دارویی با این روش به خوبی انجام می گردد. آنالیز کمی با حساسیت و دقت زیادی امکان پذیر است. تعیین ساختار پلیمرها مقایسه ساختار پروتئین های مختلف هرگونه ناخالصی با قطبیت های مختلف، قابل تشخیص است. وجود ناخالصی هایی با وزن ملکولی بسیار بالا قابل تشخیص است. وجود آب در نمونه های آزمایشی مشکلی در طی آنالیز بوجود نمی آورد. ملکولهای آب دارای پیوند هیدروژنی قابل ارزیابی است.